Горячая линия бесплатной юридической помощи:
Москва и область:
Москва И МО:
+7(499) 110-93-68 (бесплатно)
Санкт-Петербург и область:
СПб и Лен.область:
Регионы (вся Россия, добавочный обязательно):
8 (800) 500-27-29 (доб. 565, бесплатно)
Правовые документы
Назад

Для идентификации биологического материала используют

Опубликовано: 11.02.2020
Время на чтение: 23 мин
0
19

1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает требования к условиям и процедурам ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований с целью исключения или ограничения влияния эндогенных, экзогенных, ятрогенных и иных факторов, мешающих правильному отражению состояния внутренней среды обследуемых пациентов в результатах клинических лабораторных исследований.

Введение

Существует несколько
базовых технологий молекулярно-генетического (геномного)
идентификационного анализа, применяемых в судебно-медицинской
экспертной практике. Общим для них является исследование особых,
так называемых гипервариабельных участков геномной ДНК человека,
которые строго специфичны для каждого индивидуума и потому могут
служить индивидуализирующими личность признаками.

Вариант
молекулярно-генетического идентификационного анализа, в основе
которого лежит феномен полиморфизма длины амплифицированных
фрагментов (ПДАФ) ДНК, является одним из наиболее перспективных в
плане судебно-медицинского исследования вещественных доказательств.
Он отличается высокой дифференцирующей способностью - благодаря
использованию в качестве маркерных (диагностических) элементов
высокополиморфных генетических локусов мини- и микросателлитной
природы, а также чрезвычайно высокой чувствительностью - благодаря
применению процесса энзиматической амплификации молекул ДНК,
известному как полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Феномен ПДАФ проявляется
в том, что в случае ПЦР-амплификации гипервариабельных мини- и
микросателлитных генетических матриц (локусов), присутствующих в
геноме каждого человека, в ходе реакции образуются фрагменты ДНК,
которые у разных людей имеют разную длину - и потому оказываются
индивидуально специфичными.

Эти полиморфные по длине фрагменты, по
сути представляющие разные аллельные варианты полиморфных локусов
геномной ДНК, становятся доступными для сравнительного анализа в
качестве индивидуализирующих личность признаков. Важно отметить,
что в ряду поколений каждый вариант ПДАФ наследуется как простой
менделевский кодоминантный признак.

Для идентификации биологического материала используют

Все это создает прекрасные
предпосылки для решения экспертных задач, связанных как с
индивидуализацией и идентификацией, так и с установлением
биологических родственных связей данного индивидуума с другими
лицами (например, установление фактов отцовства или
материнства).ПДАФ-типирование ДНК
является одним из наиболее доказательных методов анализа
биологического материала при производстве судебно-медицинской
идентификационной экспертизы.

В то же время, следует подчеркнуть,
что экспертные исследования биологических объектов с использованием
индивидуализирующих систем ПДАФ-типа предъявляют очень высокие
требования как к техническому обеспечению анализа, так и к степени
корректности экспериментальных процедур и интерпретационных
построений.

Наряду с бесспорными преимуществами по сравнению с
традиционными методами, экспертное применение анализа ПДАФ в
судебно-медицинской практике сопряжено с целым рядом осложняющих
моментов. Технология анализа включает многостадийные операции и
многопараметрические процессы, которые таят в себе опасность
различного рода артефактов.

Интерпретация получаемых в ходе
исследования данных часто достаточно сложна и требует детального
анализа с позиции молекулярной биологии и популяционной генетики.
Учитывая же характерное для данного вида экспертизы высокое
доказательственное значение выводов, возможная неадекватность
экспериментальных процедур и неправильное истолкование результата
чреваты серьезными экспертными и, как результат,
судебно-следственными ошибками.

Из всего сказанного
очевидно, что для обеспечения надлежащего уровня надежности и
доказательности необходима строгая методическая регламентация
судебно-медицинских экспертиз вещественных доказательств,
проводимых с помощью применения методов молекулярно-генетической
индивидуализации человека. В рамках этой задачи в настоящих
Методических указаниях изложены общие принципы экспертного
использования молекулярно-генетических индивидуализирующих систем
на основе феномена ПДАФ для целей идентификации личности и
разрешения вопросов спорного происхождения детей.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие национальные стандарты:ГОСТ Р ИСО 15189-2006 Лаборатории медицинские. Специальные требования к качеству и компетентностиГОСТ Р ИСО 15190-2007* Лаборатории медицинские. Требования к безопасности_______________* Вероятно ошибка оригинала.

https://www.youtube.com/watch?v=ytcreatorsru

Следует читать ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования к безопасности, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году.

Описание метода

1.
Формула метода

Предложен метод
судебно-медицинской экспертизы (исследования) вещественных
доказательств биологической природы, основанный на
молекулярно-генетической индивидуализации человека. Принцип метода
заключается в использовании индивидуализирующих систем на основе
полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) хромосомной
ДНК.

В
общем виде метод предусматривает выделение из исследуемых объектов
хромосомной ДНК, энзиматическую амплификацию с помощью ПЦР мини- и
микросателлитных локусов этой ДНК, которые в силу своей природы
обладают свойством индивидуальной специфичности, и сопоставление
полученных индивидуальных картин распределения по длине
амплифицированных фрагментов ДНК (так называемых амплификационных
профилей) с целью их отождествления или выявления сходства и
различий и установления на этом основании определенных фактов в
плане судебно-медицинской идентификации личности и определения
биологического родства.

2.1. Требования к помещениям

а) лабораторная зона
общего назначения: помещения для хранения и препарирования
вещественных доказательств, забора крови, выделения и очистки ДНК,
мойки и стерилизации посуды; к этой зоне относятся кабинеты
экспертов, лаборантские и санитарские помещения, компьютерный зал
для обработки данных и оформления документов, аппаратные;

б) чистая зона ПЦР:
стерильные, оборудованные УФ-облучателями боксированные помещения с
приточно-нагнетательной вентиляцией - для приготовления реагентов,
компонентов реакционных смесей, для пробоподготовки и постановки
ПЦР;

в) зона для анализа
продуктов амплификации: оборудованные УФ-облучателями боксированные
помещения с вытяжной вентиляцией - для проведения электрофореза
ДНК, окрашивания гелей и документирования электрофореграмм.Компартментализация
рабочего процесса, связанного с применением ПЦР, служит абсолютно
необходимой мерой предосторожности, которая позволяет свести к
минимуму риск случайных загрязнений компонентов реакции ранее
амплифицированными продуктами или молекулами ДНК из посторонних
источников.

2.2. Необходимое оборудование

В
соответствии с процедурой метода на первом этапе осуществляется
выделение из исследуемых объектов геномной ДНК, ее очистка,
определение концентрации и хранение. Для этого необходимо типовое
лабораторное оборудование для молекулярной биологии (в том числе:
вытяжной шкаф, мини- и микроцентрифуга, суховоздушный и водяной
термостаты, рн-метр, аквадистиллятор-деионизатор, спектрофотометр,
аналитические весы, микропипетки-дозаторы, лабораторная посуда,
холодильник/морозильник).

Постановка ПЦР требует
наличия стерильного шкафа-бокса с ультрафиолетовым облучателем, а
также термоциклера (ДНК-амплификатора). Эти позиции выпускаются
серийно отечественными и зарубежными производителями.На этапе
электрофоретического фракционирования ДНК необходимы стандартные
аппараты для электрофореза в гелях агарозы и полиакриламида
(соответственно, горизонтальные и вертикальные), микроволновая
печь, стандартные источники тока для электрофореза - низковольтный
(300 в/250 mA) и высоковольтный (1000 в/300 mA),
УФ-трансиллюминатор, снабженный системой документирования
изображения (напр.

а) получение препаратов
хромосомной ДНК из объектов исследования;

Предлагаем ознакомиться  Правила дорожного движения непропуск пешеходов колонны детей

б) энзиматическая
ПЦР-амплификация на матрице этой ДНК специфических участков,
обладающих свойством ПДАФ с целью их последующего генотипирования
(определения геномных вариантов);

в) фрагментный анализ:
фракционирование с помощью гель-электрофореза продуктов
амплификации, сопоставление амплификационных профилей, определение
молекулярных размеров фрагментов и их генотипирование;

г) интерпретация
результатов: раздельная оценка выявленных геномных признаков и
определение их индивидуализирующего значения, сопоставление и
оценка различия и совпадения комплекса признаков, анализ всей
совокупности экспертных данных с целью разрешения вопросов,
поставленных перед экспертизой.

3.1. Получение препаратов ДНК

мягкие ткани,
жидкая кровь и выделения, высохшие следы крови и выделений, зубы и
волосы человека, отчлененные части тела и фрагменты частей тела от
неопознанных и расчлененных трупов, фрагменты скелетированных
трупов, отдельные кости, костные фрагменты и др. При этом важно
подчеркнуть, что во всех клетках одного организма ДНК одинакова.

Это позволяет проводить отождествление объектов на основании
сравнительного ПДАФ-анализа биологических образцов разного
тканевого происхождения.С
точки зрения экспертного использования, среди множества известных
методик выделения и очистки ДНК наибольшее значение имеет
классическая фенол-хлороформная экстракция, которая универсальна,
обладает хорошей воспроизводимостью и способна обеспечить высокую
степень чистоты ДНК;

https://www.youtube.com/watch?v=ytaboutru

полученные этим методом препараты стабильны и
могут храниться при 4°С в течение нескольких лет. Поэтому
методикам выделения ДНК, основанным на органической экстракции,
следует отдать предпочтение.В
общем случае, это многоэтапные процедуры, которые предусматривают
разрушение (лизис) клеточных структур и диссоциацию хромосомных
нуклеопротеидных комплексов с помощью применения детергентов,
протеазную обработку лизата, экстрагирование белков органическими
растворителями, отделение водной фазы, содержащей ДНК, и
концентрирование и очистку ДНК путем спиртовой преципитации или
ультрамикрофильтрации.

Существуют также
методики, которые без применения органических растворителей
позволяют получать пригодные для анализа в ПЦР препараты ДНК.
Большинство из них являются вариантами вышеприведенной схемы, но
позволяют экономить время и не прибегать к трудоемкой процедуре
фенольной экстракции. Однако эти процедуры применимы лишь для
некоторых видов объектов.

Наиболее распространенным универсальным
неорганическим методом, пригодным для экспертного применения,
является метод с использованием хелатирующего реагента "Килекс"
(Chelex(R) 100). Это экспресс-метод, который вообще не предполагает
выделения ДНК в очищенном виде; получаемый препарат по сути
представляет клеточный лизат, который содержит все исходные
компоненты, только в инактивированной форме.

Этот метод прост и не
требует много времени. Нужно однако учитывать, что его надежность,
а также качество и стабильность "килексных" препаратов в целом
заметно ниже, чем фенол-хлороформных экстрактов.Очень важный в экспертной
практике частный случай - это получение ДНК из спермы и смешанных
следов, содержащих сперму.

Особенность здесь в том, что хроматин
сперматозоидов имеет принципиальное отличие от хроматина
соматических клеток - его структура дополнительно стабилизирована
дисульфидными связями. Поэтому применяемый по стандартной процедуре
выделения ДНК протеолиз в случае спермального хроматина
малоэффективен и идет очень медленно, а используемые для
диссоциации нуклеопротеинов детергенты практически не оказывают на
него солюбилизирующего действия.

В результате выход спермальной ДНК
оказывается практически нулевым. Для преодоления этой трудности при
выделении ДНК из спермы в клеточный лизат вводят дополнительно
реагенты-тиовосстановители, например дитиотрейтол или
2-меркаптоэтанол, которые разрушают дисульфидные белковые сшивки.
Это позволяет продолжить процесс по стандартной схеме.

На использовании
описанной особенности спермального хроматина основан общепринятый
метод селективного выделения ДНК сперматозоидов из смешанных
следов, содержащих сперму. Это двухэтапная процедура, получившая
название дифференциального лизиса клеток. Суть ее заключается в
том, что при выделении ДНК из смеси сперматозоидов и соматических
клеток на первом этапе, представляющем собой стандартный
протеазно-детергентный лизис, солюбилизируется только хроматин
соматических клеток.

Его раствор отделяют центрифугированием от
остающегося структурированным (и потому нерастворимым) спермального
хроматина и используют для экстрагирования соматической ДНК.
Отделенный же спермальный хроматин подвергают второму литическому
циклу, но уже с добавлением реагентов-тиовосстановителей, и уже
потом из получившегося лизата экстрагируют спермальную ДНК.

Следует особо
подчеркнуть, что при проведении судебно-медицинского исследования
следов, содержащих сперму, для дифференцирования присутствующих в
смеси генетического материала мужчины - донора спермы и ДНК из
других возможных источников (например, эпителиальных клеток и
клеток крови потерпевших при изнасиловании), в обязательном порядке
должны применяться только такие методики, которые включают
двухэтапный дифференциальный лизис клеток с использованием на
втором этапе реагентов-тиовосстановителей.

3 Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований

3.1 Общие положения

а) условия периода, предшествующего взятию у пациента образца биологического материала (приложение А);

б) условия и процедуры взятия образца биологического материала у пациента;

в) процедуры первичной обработки образца биологического материала;

а) научных данных о постоянных и переменных факторах физического, химического и биологического характера, способных оказать влияние на содержание веществ и клеток в биологических материалах пациентов;

б) обобщенных данных о стабильности компонентов в образцах биологических материалов после их взятия при различных условиях хранения (приложения Б, В, Г);

в) обобщенных данных о влиянии принимаемых пациентом лекарственных средств на результаты лабораторных исследований (приложение Д);

- правильной подготовки пациентов к проведению лабораторных тестов;- информирования пациентов о требуемых ограничениях в диете, физической активности, курении, о правилах сбора биологических материалов, которые обычно собирает сам пациент (моча, кал);- инструктирования персонала, участвующего во взятии образцов биологических материалов у пациентов, об особенностях процедур взятия различных видов этих материалов;

- рациональной организации процесса взятия образцов биоматериалов;- полноценного обеспечения процедур взятия образцов биоматериалов необходимыми инструментами, посудой, средствами первичной обработки и транспортировки.Принимая во внимание потенциальную биоопасность образцов биологического материала, получаемого от пациентов, персонал, выполняющий эти функции, должен быть информирован и обучен правилам безопасного взятия образцов и должен располагать средствами защиты (перчатки, устройства для безопасного сбора использованных игл и т.п.

https://www.youtube.com/watch?v=https:accounts.google.comServiceLogin

) в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 15190.Настоящие правила содержат общие положения, которые по отношению к отдельным биологическим материалам и отдельным изучаемым в них аналитам, биологическим объектам могут требовать особых условий и процедур, что должно быть отражено в нормативных документах по технологиям оказания соответствующих простых или комплексных медицинских услуг, применительно к функциям различных категорий клинического персонала.

На основании этих общих правил в каждой медицинской организации следует разрабатывать и вводить для обязательного исполнения внутренние правила ведения преаналитического этапа применительно к каждому виду исследований, выполняемых в лаборатории, учитывающие особенности медицинского профиля и организационной формы учреждения.

Предлагаем ознакомиться  В каких отраслях положенв выдача спецодежды

В случае выполнения исследований в лаборатории другого учреждения правила ведения преаналитического этапа, включая условия транспортирования образцов, применительно к этим исследованиям следует согласовывать с руководителем лаборатории, выполняющей эти исследования. Наличие и исполнение персоналом правил ведения преаналитического этапа лабораторных исследований является одним из обязательных условий при сертификации процессов выполнения исследований в клинико-диагностической лаборатории.

Взятие образца или пробы - это процесс изъятия или образования проб, охарактеризованный процедурой их взятия, то есть оперативными требованиями и/или инструкциями для отбора, изъятия и подготовки одной или нескольких проб из инспектируемого лота для выяснения характеристик этого лота (в лабораторной медицине инспектируемый лот - это обследуемый пациент, а образцы или пробы - это порции того или иного биологического материала).

3.2.1 Биологический материал - кровьБольшая часть клинических лабораторных исследований проводится в образцах крови: венозной, артериальной или капиллярной. Венозная кровь - лучший материал для определения гематологических, биохимических, гормональных, серологических и иммунологических показателей.Для исследования аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены.

Показания для взятия крови из пальца на клиническое исследование крови:- при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;- при наличии у пациента очень мелких вен или когда они труднодоступны;- при выраженном ожирении пациента;- при установленной склонности к венозному тромбозу;- у новорожденных.

При взятии образца крови из венозного или артериального катетера, через который проводилось вливание инфузионного раствора, катетер следует предварительно промыть изотоническим солевым раствором в объеме, соответствующем объему катетера, и отбросить первые 5 мл (миллилитров) взятой из катетера крови.

Недостаточное промывание катетера может привести к загрязнению образца крови препаратами, вводившимися через катетер. Из катетеров, обработанных гепарином, нельзя брать образцы крови для исследований системы свертывания крови.В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определенных добавок [1].

Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты, цитрата, оксалата, гепарина [2]. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма (в точном соотношении одной части 3,8%-ного (0,129 моль/л) раствора цитрата натрия и девяти частей крови).

В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К или К-ЭДТА). Для получения сыворотки кровь собирают без антикоагулянтов. Для исследования глюкозы кровь собирают с добавлением ингибиторов гликолиза (фтористого натрия или йодоацетата).

Для исследования ряда нестабильных гормонов (остеокальцина, кальцитонина, адренокортикотропного гормона) используют ингибитор апротинин.Для получения из образцов крови вариантов проб для различных видов исследований рекомендуется следующая последовательность наполнения пробирок:- кровь без добавок - для получения гемокультуры, используемой в микробиологических исследованиях;

- кровь без антикоагулянтов - для получения сыворотки, используемой при клинико-химических и серологических исследованиях;- кровь с цитратом - для получения плазмы, используемой при коагулологических исследованиях;- кровь с гепарином - для получения плазмы, используемой при биохимических исследованиях;

- кровь с ЭДТА - для получения цельной крови, используемой для гематологических исследований, и плазмы, используемой для некоторых клинико-химических исследований.С целью сохранения в образце крови эритроцитов применяют смесь антикоагулянтов с добавками, например, АЦД (антикоагулянт - цитрат-декстроза или кислота-цитрат-декстроза).

Во избежание ятрогенной анемизации пациентов объем забираемой для исследований крови должен быть рационально рассчитан, исходя из того, что в конечном итоге непосредственно для анализа расходуется лишь половина от первоначально взятого объема (с учетом использования сыворотки или плазмы при гематокрите 0,5).

1 мл цельной крови для 3-4 иммуноанализов;- для исследования скорости оседания эритроцитов: 2-3 мл цитратной крови;- для исследования газов крови: капиллярная кровь - 50 мкл (микролитров); артериальная или венозная кровь с гепарином - 1 мл.Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (4-5 мл) при соотношении диаметра и высоты пробирки 13 на 75 мм.

Использование плазмы вместо сыворотки дает увеличение на 15%-20% выхода анализируемого материала при одном и том же объеме взятой у пациента крови. Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.

Для обозначения содержимого пробирок с различными добавочными компонентами применяют цветное кодирование закрывающих их пробок. Так, для пробирок с антикоагулянтами лиловый цвет пробки означает наличие ЭДТА, зеленый цвет - гепарина, голубой - цитрата. Добавление в пробирку ингибиторов гликолиза (фторида, йодацетата) как одних, так и в комбинации с антикоагулянтами (гепарином, ЭДТА), кодируется пробкой серого цвета (см. таблицу 1).

Таблица 1 - Добавки в пробирках с цветным кодом

Содержимое пробирки

Применение

Цвет кода

Пустая, без добавок, для сыворотки

Биохимия, серология

Красный/белый

Гепарин (12-30 Ед/мл)

Плазма для биохимии

Зеленый/оранжевый

К или К-ЭДТА (1,2-2,0 мг/мл)

Гематология и отдельные химические анализы в плазме

Лиловый/красный

Цитрат натрия (0,105-0,129 моль/л)

Коагулологические тесты

Голубой/зеленый

Фторид натрия (2-4 мг/мл)/оксалат калия (1-3 мг/мл)

Глюкоза, лактат

Серый

К-ЭДТА и апротинин

Нестабильные гормоны

Розовый

Примечание - Пробирки, содержащие кислоту-цитрат-декстрозу (АЦД, формула А и В) используют для сохранения клеток и кодируют желтым цветом.

https://www.youtube.com/watch?v=ytcopyrightru

3.2.2 Биологический материал - спинномозговая жидкостьВзятие образца спинномозговой жидкости производят в строгом соответствии с утвержденной в установленном порядке процедурой и по возможности вскоре после взятия крови для исследований в сыворотке, с результатами которых данные в спинномозговой жидкости сопоставляют.

3.1 Общие положения

Приложение А (рекомендуемое). Требования к условиям периода, предшествующего взятию у пациента образца(ов) биологического материала(ов)

Приложение А(рекомендуемое)

Требования к условиям периода, предшествующего взятию у пациента образцов биологического материала для проведения лабораторного исследования, относятся преимущественно к действиям клинического персонала (врачей, медицинских сестер), представители которого непосредственно обслуживают и курируют пациентов.

- принимаемые пациентом лекарственные средства;- оперативные вмешательства;- инъекции, вливания, переливания;- пункции, биопсии;- массаж;- эргометрия- диализ;- введение рентгеноконтрастных средств, иммуносцинтиграфия;- ионизирующее излучение;- эндоскопическое исследование;- специальные диеты.Взятие материала для выполнения лабораторного теста должно быть проведено до осуществления лечебного или диагностического мероприятия или отложено на тот или иной период времени, зависящий от длительности последействия лечебной или диагностической меры.

Примечание - После оперативного вмешательства, в зависимости от его объема и характера, изменения различных показателей могут продолжаться от нескольких дней до трех недель. После вливания растворов взятие образца крови должно быть отсрочено не менее чем на 1 ч, а после инфузии жировой эмульсии - не менее чем на 8 ч.

Предлагаем ознакомиться  Подать на биологического отца в суд чтобы он выплатил мне алименты

Лекарственные средства, способные повлиять на результаты назначенного теста in vivo или in vitro, должны быть отменены за 2-3 дня до проведения теста, если это возможно по состоянию пациента. Если отмена лекарств нежелательна, следует их возможное влияние учитывать при интерпретации результатов исследования.

В бланке назначения должны быть указаны принимаемые пациентом лекарства, если они могут влиять на лабораторные результаты. Сведения о влиянии лекарств на результаты лабораторных исследований - в соответствии с приложением Д. При наличии в распоряжении лаборатории близкого по информативности теста, на результаты которого принимаемые пациентом лекарства не оказывают влияния, следует назначить такой тест.

При необходимости лабораторного исследования на фоне лекарственной терапии взятие образца крови должно быть произведено до приема очередной дозы лекарства. При проведении терапевтического лекарственного мониторинга время взятия образца биоматериала выбирается в зависимости от характера проводимого лечения.

При длительном лечении образец крови следует брать при достижении равновесия концентрации лекарства, примерно после пяти полупериодов жизни препарата. После внутривенного введения следует выждать до завершения фазы распределения - примерно 1-2 ч. В случае введения дигоксина и дигитоксина нужно выждать 6-8 ч.

А.2 Требования учета влияния биологических факторов

А.2.1 Биологический материал - кровьПри плановом назначении лабораторного теста с исследованием крови материал для его выполнения следует брать натощак (после примерно 12 ч голодания и воздержания от приема алкоголя и курения), сразу после пробуждения обследуемого (между 7-ю и 9-ю часами утра), при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин), в положении пациента лежа или сидя.

При взятии образца материала в иное время суток должен быть указан период времени, прошедший после последнего приема пищи (после еды в крови повышается содержание глюкозы, холестерина, триглицеридов, железа, неорганических фосфатов, аминокислот), а также приняты во внимание колебания содержания ряда аналитов в течение суток (см.таблицу А.1).

Таблица А.1 - Суточные колебания содержания некоторых аналитов в крови

Аналиты

Максимум содержания (время суток в часах)

Минимум содержания (время суток в часах)

Размах колебаний (в процентах от средней за сутки)

Адреналин

9-12

2-5

30-50

АКТГ

6-10

0-4

150-200

Альдостерон

2-4

12-14

60-80

Гемоглобин

6-18

22-24

8-15

Железо

14-18

2-4

50-70

Калий

14-16

23-1

5-10

Кортизол

5-8

21-3

180-200

Норадреналин

9-12

2-5

50-120

Пролактин

5-7

10-12

80-100

Ренин

0-6

10-12

120-140

Соматотролин

21-23

1-21

300-400

T

8-12

23-3

10-20

Тестостерон

2-4

20-24

30-50

ТСГ

20-2

7-13

5-15

Фосфат

2-4

8-12

60-80

Эозинофилы

4-6

18-20

30-40

Примечание - АКТГ- адренокортикотропный гормон, Т - тироксин, TCГ - тироксинсвязывающий глобулин.

А.2.2 Биологический материал - мочаПри плановом назначении лабораторного теста с исследованием мочи материал следует собирать из утренней порции. Во избежание загрязнения мочи различными внешними примесями перед сбором образца следует провести тщательный туалет наружных половых органов. Лежачих больных предварительно подмывают слабым раствором марганцевокислого калия, затем промежность вытирают сухим стерильным ватным тампоном в направлении от половых органов к заднему проходу.

https://www.youtube.com/watch?v=ytpolicyandsafetyru

У лежачих больных, собирая мочу, необходимо следить, чтобы сосуд был расположен выше промежности во избежание загрязнения из области анального отверстия.При назначении теста с исследованием суточного количества мочи следует точно соблюдать 24-часовой период ее сбора. При исследовании аналитов в случайных порциях мочи следует иметь в виду суточные колебания их экскреции (см. таблицу А.2).

Таблица А.2 - Суточные колебания экскреции с мочой некоторых аналитов

Аналиты

Максимум экскреции (время суток в часах)

Минимум экскреции (время суток в часах)

Размах колебаний (в процентах от средней за сутки)

Кортизол

5-8

21-3

180-200

Натрий

4-6

12-16

60-80

Норадреналин

9-12

2-5

50-120

Фосфат

18-24

4-8

60-80

Примечание - Нельзя исследовать мочу во время менструации.

A.2.3 Биологический материал - калПеред исследованием кала следует отменить прием лекарственных препаратов, влияющих на секреторные процессы в желудке, на перистальтику желудка и кишечника, а также меняющих его цвет. Перед исследованием кала на скрытую кровь должны быть отменены лекарства, содержащие металлы, из диеты должны быть исключены мясо, рыба, помидоры, зеленые овощи.

А.3 Информирование пациентов об условиях подготовки к проведению лабораторных исследованийПодготовка пациента к исследованиям должна включать:- устное инструктирование пациента и выдача ему памятки об особенностях назначенного исследования (примеры памяток см. ниже);- соблюдение пациентом предписанного режима и правил сбора материала (мочи, мокроты) (особенно, во внебольничных условиях).

Пример 1 - Памятка для пациента (при назначении глюкозотолерантного теста)Глюкозотолерантный тест назначен Вашим врачом. Цель теста - определить эффективность работы инсулин-выделительного механизма Вашей поджелудочной железы и глюкозо-распределительной системы организма. Вы должны подготовить себя к этому тесту изменением диеты и приема лекарств по меньшей мере за 3 дня до проведения теста.

Очень важно, чтобы Вы точно следовали приведенной ниже инструкции, так как только в этом случае будут получены ценные результаты теста.Вы должны следовать трем главным указаниям:- количество углеводов в пище должно быть не менее 125 г в день в течение 3 дней перед проведением теста;- нельзя ничего есть в течение 12 ч, предшествующих началу теста, но ни в коем случае голодание не должно быть более 16 ч;

- не позволять себе физической нагрузки в течение 12 ч перед началом теста.Очень важно, чтобы Вы точно следовали указанным рекомендациям, так как только в этом случае будут получены достоверные результаты исследования крови.Пример 2 - Памятка для пациента (при назначении общеклинического исследования мочи)Общеклиническое исследование мочи назначено Вашим врачом.

Цель исследования - объективно оценить Ваше состояние.Для получения достоверных результатов Вам необходимо подготовить себя к этому исследованию: воздержаться от физических нагрузок, приема алкоголя, лечь спать накануне в обычное для Вас время. Вы должны собрать первую утреннюю порцию мочи. Поэтому утром после подъема Вы должны получить у медицинской сестры отделения емкость для сбора мочи.

Убедитесь, что на емкости для мочи указаны Ваши данные: фамилия, инициалы, отделение, палата. Перед сбором мочи Вам необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов, промыв их под душем с мылом, чтобы в мочу не попали выделения из них. После этой подготовки Вы идете в туалет и полностью собираете всю мочу в емкость.

Приложение Б(справочное)

https://www.youtube.com/watch?v=ytadvertiseru

Таблица Б.1 - Стабильность аналитов в пробах крови

, , ,
Поделиться
Похожие записи
Комментарии:
Комментариев еще нет. Будь первым!
Имя
Укажите своё имя и фамилию
E-mail
Без СПАМа, обещаем
Текст сообщения
Adblock detector